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基因合成技術酶學合成及化學合成法詳解

更新時間:2022-04-19      點擊次數:2419
   基因合成是體外合成雙鏈DNA的一種方法,是獲得目標基因的手段之一。人工合成基因出現于20世紀60年代,通過基因合成可以獲得自然界中不存在的基因。
  基因合成是根據一種蛋白質的基因序列,設計合成相互重疊的單鏈寡核苷酸,再通過PCR方法連接全長。基因合成不需要模板,是獲取基因的手段之一,通過提高異源宿主的表達量進行全基因合成。目前,該技術主要應用于基因異源表達,在對基因密碼子進行優化后。
 
  基因合成技術可以分為兩類:
  1、酶學合成:以RNA為模板,逆轉錄合成cDNA。這是獲取真核結構基因最主要、常用的方法。由于RNA單一成分難以分離,合成cDNA分子往往混雜,需要基因分離法分離;用這種方法很難得到全長互補的DNA分子,所以要進一步剪切、拼接。
  2、化學合成法:化學法或化學法與酶學法相結合合成目的基因。
 
  另外,基因合成技術還用于合成難以獲取模板的基因和自然界中不存在的新基因等。基因合成技術可以按照人們的意愿設計和靈活合成,正好符合現代生物學發展的潮流,將在越來越多的領域得到應用和發揮巨大的作用。
 
  基因合成的優點
  1、合成周期短,可保證序列100%準確;
  2、基因合成更靈活,可修改基因酶切位點和基因序列,便于下游克隆和實驗;
  3、研究者按照自己的意愿設計獲得自然界中難以獲得或不存在的基因;
  4、基因合成基因可進行密碼子優化,使基因在各種生物表達系統中得到良好表達。

基因合成儀

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